L’innumerevole ricchezza naturale del giardino della Villa si riflette nella sua vasta quantità e varietà di specie di piante. Un patrimonio già di per se unico, che caratterizza ancora di più Villa Rufolo come opera d’immenso spessore culturale e naturalistico. Qui si seguito è presente un piccolo excursus delle varietà floreali e arboree presente nel giardino:
Il pino domestico (Pinus pinea, L. 1753) è l'albero più tipico delle zone circostanti al mar Mediterraneo, in particolare sulle coste settentrionali, dove forma vasti boschi (pinete) e regala un'ombra molto gradita nel clima caldo e afoso dell'estate mediterranea.
Abies Alba, detto anche abete comune abezzo o avezzo, è una pianta appartenente al genere Abies, tipica delle foreste e delle montagne dell'emisfero boreale. Tale pianta, assieme al raro abete dei Nebrodi (Abies nebrodensis), è uno dei due unici abeti spontanei del nostro territorio. L'abete bianco è un albero maestoso, slanciato e longevo, e data anche la sua notevole altezza (50-60 metri), è considerato "il principe dei boschi".
Il Ficus repens o Ficus stipulata appartenente alla famiglia delle Moraceae e proveniente dalla zona del sud-est asiatico è un vigoroso rampicante con foglie cordate, piccole e di colore verde scuro. Possiede radici aeree con le quali aderisce alle superfici. Si adatta bene in cesti appesi oppure nelle coperture vegetali dei giardini interni. Molto bella e decorativa è la varietà caratterizzata dalle foglie verdi bordate di bianco.
Il tiglio nostrale o tiglio nostrano, diffuso nell'Europa continentale e nel Caucaso, è un albero che raggiunge i 40 m d’altezza , a foglie caduche, cuoriformi, a margine seghettato, con la pagina inferiore pubescente, con ciuffetti di peli biancastri negli angoli delle nervatura, che a maggio-giugno portano all'ascella i fiori profumati, forniti di brattea, di colore bianco-giallastro e riuniti in infiorescenze pendenti formate da 2-5 fiori ermafroditi, i frutti sono piccole capsule con costole sporgenti, ed endocarpo duro e legnoso.
L'Hydrangea comunemente chiamata ortensia, è una pianta legnosa arbustiva della famiglia delle Hydrangeaceae originaria della Cina e del Giappone, la specie Hydrangea macrophilla hybrida comprende numerose varietà con grosse infiorescenze globose bianche, rosa e rosse, utilizzate per la produzione in vaso o nei giardini.
Altre specie del genere Hydrangea sono l'H. paniculata arbusto con ramificazioni sottili e decombenti sotto il peso delle piccole infiorescenze bianche, è coltivata a forma di alberetto o cespuglio e si moltiplica per talea e l'H. arborescens arbusto con foglie decidue e fiori profumati. Fu introdotta in Europa nel XVIII secolo dal naturalista Philibert Commerson.